液相色譜儀廣泛應(yīng)用于各行業(yè)

液相色譜有四方面重要的作用。

 ①分離分析藥物的組合含量：由于一種藥劑常含有多組分，色譜方法是既能分離又能定量的方法。如脂溶性維生素片，含有鉻維生素，有C18柱及含1%碳酸銨的甲醇為流動(dòng)相。一次即可將各維生素B6、D1、A、E同時(shí)分離并定出含量。又如止痛藥或退燒藥也可用此法分離并測(cè)得各組分的含量。

②藥物生產(chǎn)中進(jìn)行中間控制：生產(chǎn)抗菌素時(shí)，首先要了解發(fā)酵液中的主體與付產(chǎn)物的存在情況。例如：青霉素、四環(huán)素、頭孢子菌素、紅霉素、柔紅霉素、慶大霉素等的發(fā)酵產(chǎn)物，均可用C18柱和甲醇及緩沖液配制的流動(dòng)相或用離子對(duì)法，分析主體及其收產(chǎn)物的含量。對(duì)普魯卡因酰胺、茶堿等可進(jìn)行主體含量的測(cè)定，對(duì)硝酸甘油可測(cè)定主體含量及其降解產(chǎn)物，以便保證藥物的熱量。

③分析藥物在體內(nèi)的殘量：這是近來研究新藥效能很主要的內(nèi)容之一，如冬凌草甲素是植物中的一組分，有抗癌效果，但是毒性大。測(cè)定其在血清中含量很重要，現(xiàn)在可用C18柱及甲醇水為流動(dòng)相，測(cè)定處理后的血清樣品，即可得到血中的含量。如磺胺類藥品在血清及尿中含量也不允許太大，可用C18柱及酸性乙醇為流動(dòng)相，測(cè)定含量后，則可估計(jì)zui合適的用藥劑量。又如四環(huán)素、巴比妥酸、止痛藥、退燒藥、護(hù)糖尿病的藥物等，在血或尿中的含量都可用C18柱用甲醇、水為流動(dòng)相來測(cè)定含量。因此，反相色譜法應(yīng)用范圍極廣。 ④測(cè)定藥物在各種器官中的代謝產(chǎn)物，特別是研究藥物的代謝產(chǎn)物在血清中存在的情況。如測(cè)血清中的酮酸及戊二酸。測(cè)尿中代謝產(chǎn)物更為方便，不需要繁鎖的預(yù)處理。因?yàn)檠芯磕蛑械慕M分能鑒別病人的代謝功能，對(duì)病理研究或監(jiān)床診斷均具有重要的參考價(jià)值。

 
二、生化方面

　　主要方向是分析嘌呤、嘧啶基的核甙或核甙酸及具有相應(yīng)的肽和蛋白質(zhì)。

　　①在細(xì)胞核中有種類繁多的甙及核甙酸，可用不同的檢測(cè)器或酶轉(zhuǎn)移檢測(cè)器或利用酶反應(yīng)進(jìn)行定性測(cè)定。用離子交換柱和緩沖游泳梯度淋洗。C18柱用含磷酸的緩沖水溶液的梯度淋洗法均能得到滿意的結(jié)果。

　　②分析核酸近年來有關(guān)分析核酸的研究很多，主要是分離RNA、DNA及碎片。現(xiàn)在使用硅烷化的硅藻土或長(zhǎng)碳鏈季胺鹽涂漬＝在上面制成系列填充柱。已能分離t-RNA,r-RNA及DNV碎片。有沒的緩沖液淋洗，還可利用此技術(shù)做RNA碎片的序列分離制備工具，對(duì)生物研究起了重要的作用。

③氨基酸、肽、蛋白質(zhì)的分析，氨基酸分析主要是制成熒光衍生物或酰氯的衍生物，然后測(cè)定其序列。近來也可用液相色譜的柱后衍生物法測(cè)定其序列。操作簡(jiǎn)便、速度快、深受歡迎。用四烷基氯化胺肽形成離子對(duì)或凝膠色譜測(cè)定蛋白質(zhì)，其分離效果也很好。

（補(bǔ)充下：氨基酸用液相檢測(cè)，需用柱前衍生法和柱后衍生法來處理樣品，可參照《氨基酸色譜分離方法簡(jiǎn)析》）

　　④酶的分析，酶是在血清及其他生理樣品中常有的反應(yīng)產(chǎn)物，化學(xué)分析法操作不便，易造成誤差，用色譜技術(shù)分析，具有操作簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確的特點(diǎn)。如測(cè)定堿性或酸性磷酸酶的含量，測(cè)定反應(yīng)產(chǎn)物中腺甙脫　胺酶的含量等，目前對(duì)酶用色譜法分離分析的研究工作已開展很多。

　　⑤糖的分析，糖的分析是其它方法較難完成的。如把糖與硼酸緩沖液預(yù)選混合，使生成糖-硼酸絡(luò)合離子，再進(jìn)行分離。可把蔗乳糖、阿蘆糖、果糖、阿拉伯糖、巖藻糖、半乳糖、山梨糖、木糖、葡萄糖等幾十種，全部分開。也可用胺基柱分離各種天然產(chǎn)物中伯糖的各繃分。

三、天然產(chǎn)物中主要組分的分析

天然物的組分非常復(fù)雜，如中草藥中各組分含量多少對(duì)藥劑作用影響很大。用此技術(shù)分離分析，具有簡(jiǎn)便、快速的特點(diǎn)。氨基柱能分離分析天然物中糖的組分。氰基柱能分離中藥紫草及其衍生物的組成。硅膠柱能測(cè)定成藥中馬錢了堿、苦堿等含量。C18柱分離丹參中主要組分兒茶酚、桂皮中桂皮酸、煙草中的酚類化合物、麥角或鴉片中各種植物堿，這些都是近來日益受到重視的結(jié)果。

以植提行業(yè)為例，涉及的成分大致可分為以下幾大類：

1.生物堿類:即植物堿，一種堿性含氮有機(jī)化合物，有顯著的生物活性或毒性，是中草藥重要的有效成分。

2.黃酮類:黃酮類化合物廣泛存在于植物的各個(gè)部位，尤其是花、葉部位， 約20％的中草藥中都含有黃酮類化合物，資源豐富。

3.多糖類:大于10個(gè)單糖組成的多糖化合物。如淀粉、纖維素

4.苷類:糖與一種物質(zhì)（酚類、黃酮類）結(jié)合而成的物質(zhì)

5.有機(jī)酸類

6.發(fā)油類:具有揮發(fā)性，可隨水蒸汽蒸餾出來的油狀液體，大部分具有香氣

該行業(yè)均有使用到液相（分析成分，含量），氣相（分析成分，含量，農(nóng)殘）及質(zhì)譜等儀器的潛力，但不同規(guī)模的企業(yè)對(duì)儀器的需求差別很大。目前國(guó)家沒有針對(duì)性的標(biāo)準(zhǔn)，主要以國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)（2010版）為參考。

四、食品分析
分析食品或動(dòng)物飼料中的嘌維生素含量，是當(dāng)前食品工業(yè)中的重要課題。分析食品中的黃曲霉素及各種香料，又是生產(chǎn)中的常用課題。如今此技術(shù)已在分析咖啡中的黃嘌泠、調(diào)料中的核甙酸及核甙、果汁中的有機(jī)酸、米中的維生素、牛奶中的維生素D等都對(duì)食品營(yíng)養(yǎng)價(jià)值提供有效數(shù)據(jù)。　　

分析食品中的有毒成分，如蘋果中農(nóng)藥萘乙酸、牛奶中的硝基呋喃腙、食品添加劑石臘油中的苯并芘、稻米中的黃曲霉素、魚體中的有機(jī)汞等。

五、環(huán)境分析

　　主要針對(duì)大氣中污染的成分分析，廢水和汽車尾氣中有害組分的分析。如柴油機(jī)排出的顆粒，用有機(jī)溶劑溶解后，經(jīng)色譜分析結(jié)果，有多環(huán)芳烴的硝基物，這是對(duì)人體健康有很大潛在危險(xiǎn)的化合物。又如藥廠排出的廢水中有大量硝酚、斯蒂芬酸；染料廠排出廢水中的苯胺等。用液相色譜分析簡(jiǎn)便迅速。

六、農(nóng)業(yè)分析

　　農(nóng)業(yè)中需要對(duì)各種作物中的營(yíng)養(yǎng)成分進(jìn)行各種含量分析。而液相色譜對(duì)多糖、脂肪酸蛋白質(zhì)等分析都是極為有效的方法，因此應(yīng)用頗為廣泛。

 
七、高分子材料的分析　

　　高分子工業(yè)材料及生物高分子分析是近年來新興的課題。凝膠色譜是分離分析高分子組成及鑒定其性能的方法。高分子材料中填充各種助劑、乳化劑、分散劑等物的分離，色譜技術(shù)也*特點(diǎn)。
①控制高分子產(chǎn)品質(zhì)量　在生產(chǎn)工藝中，可利用凝膠色譜測(cè)定聚合物小分子雜質(zhì)。如用凝膠色譜測(cè)定環(huán)氧樹脂中未聚合的雙酚A，用C18柱分離小分子環(huán)氧化合物，小分子聚苯乙烯或不能成膜的聚脂等，用以鑒定聚合物的質(zhì)量。
②測(cè)定聚合物的分子量分布寬度　分子量大小和分子量分布寬度是衡量聚合物質(zhì)量的一種重要指標(biāo)，用凝膠色譜可以測(cè)定。
③高溫凝膠色譜測(cè)聚合物的老化、降解現(xiàn)象及分級(jí)。如測(cè)定聚乙烯分子量應(yīng)為四萬左右，通過分析可將分子量1000以下的聚乙烯蠟分開。還可用來觀察高密度聚乙烯的氧化過程，觀察聚苯乙烯、環(huán)氧樹脂、聚磺酸脂、尼龍及聚醚聚砜等的降解情況。
④測(cè)定高分子材料的適用性　日常食品的高分子材料包裝的很多，如果測(cè)定食品中有高分子材料，則說明這種高分子材料不適于做食品和包裝。

八、化工方面
①利用分析結(jié)果找*工藝條件　如抗氧劑對(duì)叔丁基酚，為烯烴與鄰苯二酚反應(yīng)而得，通過反復(fù)在工藝過程中對(duì)生成各組分的含量分析，可求得*反應(yīng)溫度及原料配比。可通過硅膠柱分析主體中所出現(xiàn)的雜質(zhì)求得催化劑的品種及其適當(dāng)?shù)臐舛取＜徔椆I(yè)中所用的染整樹脂生產(chǎn)的反應(yīng)過程如下：
R—OH+H2N—C—NH2→R—O—C—NH2+NH3 　　R—O—C—NH2+HCHO→RO—C—N＜CH2OH
‖　　　　　　　‖　　　　　　　　　‖　　　　　　　　　‖　CH2OH
Ｏ　　　　　　　Ｏ　　　　　　　　　Ｏ　　　　　　　　　Ｏ
②表面活性劑的分析　表面活性是工業(yè)產(chǎn)品中常用的一種原料，其純度與結(jié)構(gòu)應(yīng)用性能有密切關(guān)系，液相色譜的分離有*的效果。如C18柱及甲醇、水為流動(dòng)相測(cè)定非離子表面活性劑時(shí)，可得到其純度、分子量大小及添加劑巰基苯并噻唑，也可分離聚乙二醇及吐溫系列物等。
③染料及其中間體的分析　染料中異構(gòu)物很多，大大影響了染料的色澤。通過分析，了解情況即可在工藝中采取有效措施。如磺酸類染料中間體，可用C18柱及含鹽甲醇為流動(dòng)相分析。蒽醌類中間體用C18柱及甲醇、水系為流動(dòng)相。苯胺系列用硅膠柱及含醇環(huán)已烷來分離等方法，都很有效。
④有機(jī)酸含量分析　沼氣發(fā)酵液、果汁、紅茶菌、油廠廢液等均含有各種有機(jī)酸，可用離子交換柱及緩沖液為流動(dòng)相，都能得到好的分離效果。
⑤聚合物單體的質(zhì)量分析　如雙酚A是環(huán)氧樹脂、聚砜、聚碳酸脂的原料，其質(zhì)量的好壞與聚合物質(zhì)量有密切關(guān)系，其中以所含異丙烯基苯酚的含量影響zui壞，可須知硅膠柱及氯仿流動(dòng)相分析其含量，然后在工藝中除去。各種醛、酮的二硝基苯腙衍生物，各種烷基酚，羥苛酷酚等均可用此法分離。

 
九、無機(jī)分析

　　自從有了離子交換柱后，液相色譜又有一個(gè)新分支——離子色譜。它能分析有機(jī)離子化合物，也能分析無機(jī)離子。特別是用在一般方法難以分離的陰離子，稀土元素，稀有元素等的分離方面。還可以制成金屬絡(luò)合物的結(jié)構(gòu)進(jìn)行分離，較用萃取比色法測(cè)含量方便得多。是一種很有前途的分析方法。